Isolation of Clostridium perfringens and C. difficile in crab-eating fox ( Cerdocyon thous - Linnaeus 1776) from Northeastern Brazil / Isolamento de Clostridium perfringens e C. difficile em cachorro-do-mato (Cerdocyon thous - Linnaeus 1776) da região Nordeste do Brasil

The aim of the present study was to isolate Clostridium perfringens and C. difficile in crab-eating fox (Cerdocyon thous) from Northeastern Brazil. Stool samples of 18 captive crab-eating foxes from four states of Northeastern Brazil (Alagoas, Bahia, Paraíba e Pernambuco) were collected and subjected to C. perfringens and C. difficile isolation. Suggestive colonies of C. perfringens were then analyzed for genes encoding the major C. perfringens toxins (alpha, beta, epsilon and iota), beta-2 toxin (cpb2), enterotoxin (cpe), and NetB- (netB) and NetF- (netF) encoding genes. C. difficile strains were analyzed by multiplex-PCR for a housekeeping gene (tpi), toxins A (tcdA) and B (tcdB) and a binary toxin gene (cdtB). Unthawed aliquots of stool samples positive for toxigenic C. difficile were subjected to a commercial ELISA to evaluate the presence of A/B toxins. Clostridium perfringens (type A) was isolated from five (27%) samples, and only one sample was positive for beta-2 enconding gene (cpb2). Two (11%) stool samples were positive for C. difficile, but negative for A/B toxins. These two wild canids were also positive for C. perfringens type A. This is the first report of C. difficile in crab-eating fox.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar Clostridium perfringens e C. difficile em cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) da região Nordeste do Brasil. Amostras de fezes de 18 cachorros-do-mato mantidos em cativeiro e oriundos de quatro estados da região Nordeste do Brasil (Alagoas, Bahia, Paraíba e Pernambuco) foram coletadas e submetidas a isolamento de C. perfringens e C. difficile. As colônias sugestivas de C. perfringens foram analisadas para os genes que codificam as principais toxinas de C. perfringens (alfa, beta, épsilon e iota), toxina beta-2 (cpb2), enterotoxina (cpe) e NetB- (netB) e NetF- (netF). As cepas de C. difficile foram analisadas por PCR-multiplex para o gene tpi, toxinas A (tcdA) e B (tcdB) e um gene de toxina binária (cdtB). Alíquotas de amostras de fezes positivas para C. difficile toxigênico foram submetidas a um ELISA comercial para avaliar a presença de toxinas A/B. Clostridium perfringens (tipo A) foi isolado de cinco (27%) amostras, e apenas uma amostra foi positiva para o gene da toxina beta-2 (cpb2). Duas (11%) amostras de fezes foram positivas para C. difficile, mas negativas para toxinas A/B. Estes dois canídeos silvestres também foram positivos para C. perfringens tipo A. Este é o primeiro relato de C. difficile em cachorro-do-mato.(AU)

ADME studies and preliminary safety pharmacology of LDT5, a lead compound for the treatment of benign prostatic hyperplasia

This study aimed to estimate the absorption, distribution, metabolism and excretion (ADME) properties and safety of LDT5, a lead compound for oral treatment of benign prostatic hyperplasia that has previously been characterized as a multi-target antagonist of α1A-, α1D-adrenoceptors and 5-HT1A receptors. The preclinical characterization of this compound comprised the evaluation of its in vitro properties, including plasma, microsomal and hepatocytes stability, cytochrome P450 metabolism and inhibition, plasma protein binding, and permeability using MDCK-MDR1 cells. De-risking and preliminary safety pharmacology assays were performed through screening of 44 off-target receptors and in vivo tests in mice (rota-rod and single dose toxicity). LDT5 is stable in rat and human plasma, human liver microsomes and hepatocytes, but unstable in rat liver microsomes and hepatocytes (half-life of 11 min). LDT5 is highly permeable across the MDCK-MDR1 monolayer (Papp ∼32×10-6 cm/s), indicating good intestinal absorption and putative brain penetration. LDT5 is not extensively protein-bound and is a substrate of human CYP2D6 and CYP2C19 but not of CYP3A4 (half-life >60 min), and did not significantly influence the activities of any of the human cytochrome P450 isoforms screened. LDT5 was considered safe albeit new studies are necessary to rule out putative central adverse effects through D2, 5-HT1A and 5-HT2B receptors, after chronic use. This work highlights the drug-likeness properties of LDT5 and supports its further preclinical development.

The anti-inflammatory and antinociceptive effects of proteins extracted from Acacia farnesiana seeds / Efeito antiiflamatório e antinociceptivo de proteínas extraídas de sementes de Acacia farnesiana

ABSTRACT Seeds of Acacia farnesiana are commonly sold in the local markets of northeastern Brazil as a therapeutic agent. The present work aimed to evaluate the anti-inflammatory and analgesic activities of proteins obtained from A. farnesiana seeds. Five different protein fractions (albumin, globulin, prolamin, acidic and basic glutelins) were obtained and investigated for the protein pattern, the presence of hemagglutinating and proteolytic activities. The globulin fraction (GLB) was also evaluated for anti-inflammatory and analgesic activities. Globulins reduced the paw edema induced by carrageenan in a dose-dependent manner, which was accompanied by a reduction of myeloperoxidase activity (p < 0.05). Additionally, GLB reduced the neutrophil peritoneal migration induced by carrageenan. However, GLB was not able to inhibit the edema triggered by dextran. Pre-treatment with globulins reduced the abdominal constrictions induced by acetic acid as well as the paw licking time induced by formalin (69.1% at first phase). However, it did not produce a significant antinociceptive effect in the hot plate test (55-56 °C). Treating the GLB with heat (at 100 °C for 30 min) abolished its anti-edematogenic and hemagglutinating activities. Our results showed that seeds from A. farnesiana are a source of proteins with anti-inflammatory and analgesic properties.

RESUMO Sementes de Acacia farnesiana são comumente vendidas em feiras locais no nordeste do Brasil como agente terapêutico. O presente trabalho objetivou avaliar as atividades antiinflamatória e antinociceptiva de proteínas obtidas de sementes de A. farnesiana. Cinco frações protéicas distintas (albuminas, globulinas, prolaminas, glutelinas ácidas e básicas) foram obtidas e investigadas quanto o perfil de proteínas, presença de atividade hemaglutinante e proteolítica. A fração globulina (GLB) também foi avaliada quanto a presença de atividade antiinflamatória e analgésica. Globulinas reduziram o edema de pata induzido por carragenina de modo dependente da dose que foi acompanhada da redução da atividade da mieloperoxidase (p < 0,05). Em adição, GLB reduziu a migração de neutrófilos para cavidade peritoneal induzida por carragenina. Entretanto, GLB não foi capaz de inibir o edema induzido por dextrana. O pré-tratamento com globulinas reduziu as contorções abdominais induzidas por ácido acético, bem como o tempo de lambedura da pata induzida por formalina (69.1% na primeira fase). Por outro lado, GLB não produziu um efeito antinociceptivo significante no teste de placa quente (55-56 °C). O pré-tratamento de GLB com calor (100 °C por 30 min) aboliu sua atividade anti-edematogênica e hemaglutinante. Nossos resultados mostraram que sementes de A. farnesiana são fonte de proteínas com propriedades antiinflamatórias e analgésicas.

The hydrogen sulfide donor, Lawesson's reagent, prevents alendronate-induced gastric damage in rats

Our objective was to investigate the protective effect of Lawesson's reagent, an H2S donor, against alendronate (ALD)-induced gastric damage in rats. Rats were pretreated with saline or Lawesson's reagent (3, 9, or 27 µmol/kg, po) once daily for 4 days. After 30 min, gastric damage was induced by ALD (30 mg/kg) administration by gavage. On the last day of treatment, the animals were killed 4 h after ALD administration. Gastric lesions were measured using a computer planimetry program, and gastric corpus pieces were assayed for malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), proinflammatory cytokines [tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-1β], and myeloperoxidase (MPO). Other groups were pretreated with glibenclamide (5 mg/kg, ip) or with glibenclamide (5 mg/kg, ip)+diazoxide (3 mg/kg, ip). After 1 h, 27 µmol/kg Lawesson's reagent was administered. After 30 min, 30 mg/kg ALD was administered. ALD caused gastric damage (63.35±9.8 mm2); increased levels of TNF-α, IL-1β, and MDA (2311±302.3 pg/mL, 901.9±106.2 pg/mL, 121.1±4.3 nmol/g, respectively); increased MPO activity (26.1±3.8 U/mg); and reduced GSH levels (180.3±21.9 µg/g). ALD also increased cystathionine-γ-lyase immunoreactivity in the gastric mucosa. Pretreatment with Lawesson's reagent (27 µmol/kg) attenuated ALD-mediated gastric damage (15.77±5.3 mm2); reduced TNF-α, IL-1β, and MDA formation (1502±150.2 pg/mL, 632.3±43.4 pg/mL, 78.4±7.6 nmol/g, respectively); lowered MPO activity (11.7±2.8 U/mg); and increased the level of GSH in the gastric tissue (397.9±40.2 µg/g). Glibenclamide alone reversed the gastric protective effect of Lawesson's reagent. However, glibenclamide plus diazoxide did not alter the effects of Lawesson's reagent. Our results suggest that Lawesson's reagent plays a protective role against ALD-induced gastric damage through mechanisms that depend at least in part on activation of ATP-sensitive potassium (KATP) channels.

In vitro evaluation of Clostridium septicum alpha toxoid / Avaliação in vitro de toxoide alfa de Clostridium septicum

Aiming to investigate in vitro alternatives, a test for neutralizing antibody detection using cell culture was developed. This test was more sensitive than previous animal models, allowing for detection of substantially lower alpha toxin and anti-alpha toxin titers. Titers observed during in vivo and in vitro seroneutralization had a correlation of 99.12 percent, indicating that cell culture is a viable alternative in the evaluation of vaccine potency, screening of vaccinal seeds, and Clostridium septicum alpha toxin titration.

Padronizou-se um teste para detecção de anticorpos neutralizantes in vitro, em cultura de células. O modelo in vitro mostrou-se mais sensível que os testes com animais, permitindo a detecção de títulos de toxina e antitoxina alfa mais baixos. Os títulos observados na soroneutralização in vivo e in vitro, apresentaram correlação de 99,12 por cento, demonstrando ser a cultura de células uma alternativa viável na avaliação da potência de vacinas, triagem de sementes vacinais e titulação de toxina alfa de Clostridium septicum.

Mionecroses clostridiais bovinas / Bovine clostridial myonecrosis

As mionecroses são enfermidades altamente fatais, representadas pelo carbúnculo sintomático e edema maligno. Com o objetivo de determinar a ocorrência dos diferentes clostrídios envolvidos nas mionecroses em bovinos no Brasil, foi realizado um estudo retrospectivo a partir de 30 casos suspeitos de carbúnculo sintomático e edema maligno. Empregou-se a técnica de estreptavidina biotina peroxidase em tecidos de bovinos fixados em formol e incluídos em parafina de arquivos de patologia de diferentes estados do país. Foram detectados 21 Clostridium chauvoei (70%), cincoClostridium septicum(17%), seguidos de doisC. chauvoeiassociado aoC. septicum (7%), um C. chauvoei mais Clostridium sordellii (3%) e um C. chauvoei mais Clostridium novyi tipo A (3%). Este é o primeiro diagnóstico de C. novyi tipo A no Brasil, e o primeiro relato da ocorrência de C. chauvoei associado à lesão no miocárdio. Os achados da maior ocorrência de C. chauvoei e C. septicum corroboram com estudos anteriores no país. Estes dados sobre a ocorrência dos agentes responsáveis pelas mionecroses em diferentes estados do país são de extrema importância frente às decisões relativas ao controle dessas enfermidades.

Clostridial myonecroses are highly fatal diseases, characterized by black leg and malignant oedema. In order to determine the occurrence of the different agents involved in Brazilian clostridial myonecrosis, a retrospective study was conducted concerning 30 suspected cases of blackleg and gas gangrene using a streptavidin-biotin peroxidase technique in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of cattle from the archives of pathology of different states of Brazil. The clostridia predominantly detected wereClostridium chauvoei(70%), followed by Clostridium septicum (5 cases or 17%), C. chauvoei plus C. septicum (2 cases or 7%), C. chauvoei plus Clostridium sordellii (1 case or 3%), C. chauvoei plus Clostridium novyi type A (1 case or 3%). This is the first diagnosis of C. novyi type A in Brazil. The findings of the higher occurrence of C. chauvoei and C. septicum concur with previous works in Brazil. This article also includes the first report in Brazil of the occurrence of C. chauvoei associated with a lesion in the myocardium. Thus, this study supplies important data about the occurrence of the agents responsible for clostridial myonecrosis in different states of Brazil, these data being important for decisions relative to control of these diseases.

Antimicrobial susceptibility of Clostridium perfringens strains isolated from broiler chickens / Sensibilidade antimicrobiana de estirpes de Clostridium perfringens isoladas de aves de corte

Clostridium perfringens is a normal inhabitant of the intestinal tract of chickens as well as a potential pathogen that causes necrotic enteritis and colangio hepatitis. The minimum inhibitory concentration (MIC) of seven different compounds used for therapy, growth promotion or prevention of coccidiosis was determined by agar dilution method for 55 C. perfringens strains isolated from the intestines of broiler chickens. All strains showed high susceptibility to penicillin, avilamycin, monensin and narasin. Only 7.3% of the strains showed an intermediated sensitivity to lincomycin, and 49 (89.1%) were considered susceptible. For tetracycline and bacitracin, 41.8% and 47.3% of strains, respectively, were considered resistant.

Clostridium perfringens é um habitante normal da microbiota intestinal de frangos, sendo um agente potencialmente patogênico, causador de enterite necrótica e colangio-hepatite.A concentração inibitória mínima (CIM) de sete drogas utilizadas na terapêutica, como agentes promotores de crescimento ou na prevenção de coccidiose foi determinada pelo método de diluição em ágar para 55 estirpes de C. perfringens isoladas do intestino de frangos de corte. Todas as estirpes revelaram alta sensibilidade à penicilina, avilamicina, narasin e monensina, apenas 7,3% demonstraram CIM intermediário para lincomicinae 89.1% foram consideradas sensíveis. Para tetraciclina e bacitracina, 41,8% e 47.3% das amostras, respectivamente, foram consideradas resistentes.

Infeccao urinaria e gravidez. / Urinary infection and pregnancy

Estudaram-se retrospectivamente 66 gestantes portadoras de infeccao urinaria, sendo 55,2% multiparas. Do total, 45,4% adquiriram a patologia no terceiro trimestre da gravidez. A sintomatologia mais frequente foi representada por disuria a polaciuria, e o exame complementar indispensavel, a urocultura, foi negativo em 37,9% dos casos Dentre aqueles positivos, 85,4% continham menos de 100.000 colonias. Escherichia coli a Aerobacter aerogenes foram as bacterias mais frequentemente identificadas, e a gentamicina e as cefalosporinas, os antibioticos de maior sensibilidade. As complicacoes, incluidos os abortos e partos prematuros, somam 45,5% com destaque para a interrupcao prematura da prenhez em 31,9% dos casos. Por sua importancia a infeccao urinaria na gravidez requer cuidadosa atencao do tocologo, atraves da profilaxia e apropriado tratamento, a fim de se evitar sua alta morbidade

Esofagoplastia com a grande curvatura gastrica - o tubo gastrico invertido. / Esophagoplasty with a great gastric curvature - the reversed gastric tube

Foram descritos pelos autores nove pacientes, nos quais a tecnica de substituicao total do esofago ou faringe pela grande curvatura gastrica, descrita por Gavrilliu foi empregada. Essa tecnica do tubo gastrico invertido (TGI) apresenta grandes vantagens sobre outros procedimentos, principalmente devido ao fato de que o neo-esofago se comporta normalmente com relacao a sua motilidade, o pH e nitidamente alcalino e nao apresenta ulceracao, mesmo apos varios anos do seu emprego

Isoimunizacao feto-materna. I. Caracteristicas maternas. / Feto-maternal immunization. I. Maternal characteristics

Estudaram-se, no periodo de 1970 a l977, l.l53 pacientes gravidas, com fator Rh negativo. No grupo de gestantes imunizadas, analisaram-se os seguintes parametros: incidencia, frequencia da isoimunizacao, numero de gestacoes, paridade, grupo sanguineo materno e paterno, incompatibilidade ABO e antecedentes maternos. Observou-se que a frequencia de isoimunizacao correspondeu, nesse periodo, a 8,2%. 80% das gestantes estavam entre 25 a 30 anos; 51,58% tinham entre 3 a 5 gestacoes e a frequencia de isoimunizacao cresceu proporcionalmente a este parametro, bem como em relacao a paridade. Encontraram-se 50,53% de pacientes pertencentes ao grupo A e 33,68% ao grupo O. Houve predominio (79,92%) de gestantes compativeis no sistema ABO

Isoimunizacao feto-materna. II. Aspectos laboratoriais. Valor do teste indireto de Coombs no soro materno. / Feto-maternal immunization. II. Laboratorial aspects. Value of indirect Coombs test in maternal serum

Foram analisados 229 testes indiretos de Coombs no soro materno, realizados em 95 gestantes Rh negativo isoimunizadas, correlacionando-os com a bilirrubina do liquido amniotico e com a hemoglobina e a bilirrubina total do recem-nato, os dois ultimos elementos determinados por ocasiao do parto. Conclui-se pela validade do titulo de l:8 como valor critico para o teste indireto de Coombs no soro materno. Acima desse valor, piora o prognostico fetal

Isoimunizacao feto-materna. III. Aspectos pediatricos. / Feto-maternal isoimmunization. III. Pediatric aspects

Estudando 66 recem-nascidos de maes Rh negativo isoimunizadas, os autores analisaram o tipo de parto, o grupo sanguineo, a idade gestacional, o peso, as condicoes de nascimento e o tratamento recebido no bercario. Os recem-natos foram divididos em tres grupos, de acordo com o fator Rh e o teste de Coombs direto: Grupo 1 - Recemnascidos Rh positivo e Coombs direto positivo. Grupo 2 - Recem-nascidos Rh positivo e Coombs direto negativo. Grupo 3 - Recemnascidos Rh negativo. Concluiu-se que os fatores com teste de Coombs direto positivo (grupo 1) apresentaram maior gravidade.Quanto menor a passagem de anticorpos da mae ao concepto, menor a gravidade

Isoimunizacao feto-materna. IV. Mortalidade perinatal. / Feto-maternal isoimmunization. IV. Perinatal mortality

Os 66 recem-nascidos de maes sensibilizadas pelo fator Rh entre 1970 e 1977, como ja especificado em trabalho anterior, foram divididos em tres grupos: Grupo l Recem--nascidos Rh-positivo e Coombs direto positivo. Grupo 2 - Recem-nascidos Rhpositivo e Coombs direto negativo. Grupo 3 Recem nascidos Rh-negativo. No presente trabalho, analisa-se a mortalidade perinatal. Dividindo-se o periodo de estudo em etapas de 1970 a 1973 e de 1974 a 1977, pode-se notar que houve queda da mortalidade neonatal. O fato se deve provavelmente a melhor eficacia da assistencia obstetrica e pediatrica, principalmente pela melhor atencao aos fetos com hemoglobina menor que 14 g/ l00 ml e bilirrubina total maior que 5 mmg/ l00 ml. Sao esses os fetos que recebem maior quantidade de anticorpos

Valor prognostico da dosagem de bilirrubina no liquido amniotico. / Prognostic value of bilirubin dosage in amniotic fluid

Estudaram-se 204 amostras de liquido amniotico obtidos atraves de amniocentese transabdominal em 95 gestantes Rh-negativo isoimunizadas. Dosou-se a bilirrubina no liquido amniotico pelos metodos de Liley e de Brazzie e col., correlacionando os valores obtidos pelos metodos entre si e com os valores de hemoglobina e bilirrubina total fetais ao nascimento. Discutidos os resultados, concluiu-se que, no que concerne a dosagem da bilirrubina no liquido amniotico, os dois metodos sao semelhantes podendo-se portanto utilizar o metodo de Brazzie e col., de mais facil execucao.Quando comparadas a bilirrubina total e a hemoglogina do sangue do cordao umbilical do recem-nascido com a dosagem no liquido amniotico efetuada pelos dois metodos, nao se conseguiu correlacao para definir os niveis de hemoglobina que o feto apresentara ao nascer. Correlacionando-se os graficos de prognostico de ambos os metodos com a mortalidade perinatal, verificou-se serem identicas a sobrevivencia e a natimortalidade previstas pelos dois metodos

Empiema pleural. Proposta terapeutica baseada no estudo de l00 casos. / Pleural empyema. Treatment proposal based on 100 cases

Os autores fizeram um relato de 100 casos de empiema pleural tratados no Hospital de Base do Distrito Federal. Observaram-se nesse grupo: uma media de idade de 35 anos, 75% de pacientes do sexo masculino e 25% do sexo feminino; 58% eram no lado direito e o restante no lado esquerdo. Setenta e nove foram devidos a traumatismo toracico e pneumonia. Quanto a bacteriologia, encontramos predominancia de Staphylococcus aureus, Pseudomonas, E. coli e Klebsiella, nas infeccoes unicas, e nas mistas o Staphylococcus aureus e a Klebsiella. O tratamento efetuado consistiu, na maioria dos casos, em drenagem aberta atraves do retalho pleurocutaneo em 40 casos, toracotomia fechada em 20, decorticacao em 16, em seguida toracoplastia (7 casos), resseccao pulmonar mais toracoplastia (4 casos), broncomioplastia (4 casos) e toracocentese (2 casos). Houve uma mortalidade de 6%. Foi tambem descrita a tecnica do retalho pleurocutaneo de base inferior